प्रतिदीप्ति और डाई लेबलिंग पेप्टाइड्स

मेटा विवरण

सेल इमेजिंग या फ्लो साइटोमेट्री के लिए फ्लोरोसेंट या डाई-लेबल वाले पेप्टाइड्स की आवश्यकता है? विज्ञान {{1}पेप्टाइड फ्लोरोसेंट और डाई लेबल पेप्टाइड संश्लेषण सेवा प्रदान करता है, FITC, FAM, TAMRA, Cy3/Cy5, बायोटिन, रोडामाइन और अन्य रंग चयन, निश्चित बिंदु लेबलिंग, उच्च शुद्धता और सख्त गुणवत्ता नियंत्रण के लिए उपलब्ध हैं। हमसे संपर्क करने के लिए आपका स्वागत है.

फ्लोरोसेंट और डाई-लेबल पेप्टाइड्स: देखना ही विश्वास करना है

पेप्टाइड्स का लेबल क्यों लगाया गया?
जो कोई भी जैविक अनुसंधान करता है वह समझता है कि अक्सर पेप्टाइड का होना पर्याप्त नहीं होता है, लेकिन आपको इसे "देखने" में सक्षम होना होगा - यह देखने के लिए कि यह किस कोशिका में प्रवेश कर चुका है, यह किस प्रोटीन से बंधा है, और शरीर के चारों ओर घूमने के बाद यह कहाँ चला गया है।

फ्लोरोसेंट और डाई-लेबल वाले पेप्टाइड्स बस यही करते हैं। एक फ्लोरोसेंट समूह या डाई को पेप्टाइड से जोड़कर, पेप्टाइड की "आंखें" होती हैं और यह जहां भी जाता है, इसे ट्रैक किया जा सकता है।

इसके बिना कौन से प्रयोग नहीं किये जा सकते?
सेलुलर इमेजिंग: यह देखने के लिए कि क्या पेप्टाइड कोशिका में प्रवेश कर चुका है और वह कहाँ रह रहा है
फ्लो साइटोमेट्री: सकारात्मक कोशिकाओं को बांधने वाले पेप्टाइड के अनुपात का विश्लेषण
प्रतिदीप्ति ध्रुवीकरण: पेप्टाइड -रिसेप्टर बाइंडिंग एफ़िनिटी का एक अध्ययन
ऊतक स्थानीयकरण: जानवरों में पेप्टाइड्स के वितरण को देखना
FRET प्रयोग: प्रोटीन -प्रोटीन अंतःक्रियाओं का अध्ययन

हम क्या कर सकते हैं

1. फ्लोरोसेंट डाई का प्रकार, यह इस बात पर निर्भर करता है कि आपको क्या चाहिए

डाई प्रकार	उत्तेजना/उत्सर्जन तरंगदैर्घ्य	सामान्य अनुप्रयोग
FITC	495nm/525nm	प्रवाह, प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी, लागत-प्रभावी
परिवार	495nm/520nm	एफआईटीसी के समान, आमतौर पर डीएनए/पेप्टाइड लेबलिंग के लिए उपयोग किया जाता है
तमारा	555एनएम/580एनएम	झल्लाहट रिसेप्टर, कन्फोकल इमेजिंग
Cy3	550nm / 570nm	स्थिर, उच्च चमक, आमतौर पर ऊतक इमेजिंग के लिए उपयोग किया जाता है
Cy5	650nm / 670nm	सुदूर-लाल, कम ऊतक पृष्ठभूमि, इन विवो इमेजिंग के लिए उपयुक्त
रोडामाइन बी	540एनएम/625एनएम	माइटोकॉन्ड्रियल लेबलिंग, प्रकाश स्थिर
रोडामाइन लाल	570एनएम/590एनएम	सेलुलर इमेजिंग, फोटोब्लीचिंग के प्रति प्रतिरोधी
बायोटिन	गैर{0}}चमकदार, आत्मीयता{{1}आधारित	एलिसा, पुल-डाउन, हिस्टोकेमिस्ट्री

क्या अन्य डाई की आवश्यकता है? एलेक्सा फ्लोर श्रृंखला, टेक्सास रेड, पैसिफिक ब्लू, आप इसे नाम दें, हम यह कर सकते हैं।

2. स्थान चिह्नित करें, देखें कि आप कहां जुड़े हुए हैं

मार्कर साइटें	कनेक्ट कैसे करें	इसका उपयोग कब करना है
एन-टर्मिनल	अमीनो के साथ डाई-एनएचएस एस्टर की प्रतिक्रिया	सबसे अधिक उपयोग किया जाता है, प्राथमिकता तब दी जाती है जब N-टर्मिनल अद्वितीय हो
लिस साइडचेन	डाई{{0}एनएचएस एस्टर की ε-अमीनो एसिड के साथ प्रतिक्रिया	यदि एक से अधिक Lys हैं, तो इसे यादृच्छिक रूप से लेबल किया जा सकता है
सीआईएस साइड चेन	सल्फ़हाइड्रील समूहों के साथ डाई-मेलीमाइड की प्रतिक्रिया	अत्यधिक विशिष्ट, इसका उपयोग तब किया जाता है जब निःशुल्क Cys मौजूद हो
सी-सुइट	विशेष डिज़ाइन की आवश्यकता है	इसका उपयोग तब किया जाता है जब N-टर्मिनल को बरकरार रखा जाता है
आंतरिक विशेष लोकेटर	ऑर्थोगोनल सुरक्षा रणनीतियाँ	इसे वहां हिट करने के लिए डिज़ाइन करने की आवश्यकता है जहां इसे हिट करना है

3. लेबल वाले पेप्टाइड्स जिन्हें हम संश्लेषित कर सकते हैं
एकल मार्कर: केवल एक डाई जुड़ी होती है, जिसका सबसे अधिक उपयोग किया जाता है
डबल लेबलिंग: दो अलग-अलग रंग, झल्लाहट करें
रंग + अन्य संशोधन: उदाहरण के लिए फॉस्फोराइलेटेड या बायोटिन दोनों के साथ
शमन मार्कर: उदाहरण के लिए EDANS/DABCYL FRET जोड़े

4. सिंथेटिक क्षमताएँ

परियोजना	क्षमता
पेप्टाइड लंबाई	5-80 अमीनो एसिड
डाई प्रकार	FITC, FAM, TAMRA, Cy3, Cy5, रोडामाइन, बायोटिन, और अन्य
मार्कर साइटें	एन-टर्मिनल, सीआईएस, लिस, आंतरिक निश्चित बिंदु
शुद्धता का विकल्प	पारंपरिक (85-95%), उच्च शुद्धता (95-98%)
एकल-स्ट्रिप आउटपुट	1-20 मिलीग्राम (पेप्टाइड लंबाई और डाई के आधार पर)
वितरण का रूप	सेंट्रीफ्यूज ट्यूब, सीरिंज (प्रकाश से दूर रखें)
दौरा	3-4 सप्ताह (मार्कअप जटिलता के आधार पर)

5. क्यूसी: पुष्टि कि डाई जुड़ी हुई है
फ्लोरोसेंट और डाई लेबल वाले पेप्टाइड्स का गुणवत्ता नियंत्रण इस बात पर निर्भर करता है कि डाई सफलतापूर्वक जुड़ी है या नहीं और शुद्धता मानक के अनुरूप है या नहीं।

एमएस मास स्पेक्ट्रोमेट्री: यह देखने के लिए कि क्या आणविक भार डाई के द्रव्यमान को बढ़ाता है
एचपीएलसी: शुद्धता देखने के लिए, और यह भी देखने के लिए कि क्या कोई मुक्त डाई अवशेष है

फ्लोरोसेंटली लेबल वाले पेप्टाइड्स के लिए हमें क्यों कॉल करें?

1. हम 20 वर्षों से ऐसा कर रहे हैं
प्रतिदीप्ति और डाई-लेबल वाले पेप्टाइड्स "डाई" की तरह लग सकते हैं, लेकिन सटीक साइट, पूर्ण लेबलिंग और प्रतिदीप्ति का शमन न करने के लिए अभी भी बहुत सारी तरकीबें हैं। इन वर्षों में, हमने अपने ग्राहकों को विभिन्न प्रकार के पेप्टाइड्स को लेबल करने में मदद की है: सबसे सरल एफआईटीसी लेबलिंग से लेकर जटिल डबल {{2}लेबल वाले एफआरईटी जांच तक, छोटे पेप्टाइड्स से लेकर लंबे पेप्टाइड्स तक, हमने अनुभव संचित किया है।

2. मार्कर साइट नियंत्रण, जहां भी आप कहें
कुछ कंपनियाँ केवल N-टर्मिनल लेबलिंग करती हैं, इसलिए आप यह नहीं बता सकते कि आप स्थान बदल रहे हैं या नहीं। हम अलग - अलग है:
एन-टर्मिनल लेबलिंग: नियमित संचालन, एनएचएस एस्टर के साथ, अच्छी चयनात्मकता
सीआईएस स्पॉट लेबलिंग: मेलिमाइड, उच्च विशिष्टता का उपयोग करें, मुफ्त सीआईएस वाले पेप्टाइड्स के लिए उपयुक्त
लिस अंकन: नियंत्रित किया जा सकता है, यदि केवल एक लिस है, तो यह एक निश्चित बिंदु है; यदि एक से अधिक हैं, तो सुरक्षा रणनीति तैयार की जा सकती है
आंतरिक निश्चित -बिंदु अंकन: ऑर्थोगोनल सुरक्षा, बिंदु और शूट

3. रंगों की एक विस्तृत श्रृंखला, सामान्य और असामान्य दोनों
सामान्य रंग: FITC, FAM, TAMRA, Cy3, Cy5, रोडामाइन, बायोटिन
विशेष रंग: एलेक्सा फ्लोर श्रृंखला, टेक्सास रेड, पैसिफ़िक ब्लू, आदि को अनुकूलित किया जा सकता है
झल्लाहट जोड़े: EDANS/DABCYL, Cy3/Cy5, आदि

4. पैसे की बर्बादी के बिना, मांग पर शुद्धता
नियमित शुद्ध (85-95%): सेलुलर इमेजिंग, प्रवाह के लिए पर्याप्त
उच्च शुद्धता (95-98%): मात्रात्मक प्रयोग, एफआरईटी अध्ययन, अधिक स्थिर परिणाम

5. डेटा पूर्ण और स्पष्ट रूप से लेबल किया गया है
हम आपको यह बताने के लिए प्रत्येक लेबल वाले पेप्टाइड के लिए एमएस और एचपीएलसी डेटा प्रदान करते हैं कि डाई जुड़ी हुई है या नहीं, और यह कितनी शुद्ध है।

6. स्क्रीनिंग से लेकर आवेदन तक, हर तरह से
लेबल किए गए पेप्टाइड को खोजने के बाद, अक्सर अधिक अनुवर्ती कार्य की आवश्यकता होती है: उदाहरण के लिए, पशु इमेजिंग के लिए प्रवर्धन, अभिकर्मक किटों का विकास, आदि। विज्ञान -पेप्टाइड को निर्बाध रूप से एकीकृत किया जा सकता है, एक ही परियोजना प्रबंधक परियोजना को अंत तक दोहराए संचार की आवश्यकता के बिना अनुसरण करता है।

जहां फ्लोरोसेंटली लेबल वाले पेप्टाइड्स का उपयोग किया जाता है

अनुसंधान क्षेत्र	यह काम किस प्रकार करता है	अनुशंसित रंग
सेलुलर इमेजिंग	यह इस पर निर्भर करता है कि पेप्टाइड किस कोशिका में प्रवेश करता है और कहाँ रहता है	FITC,TAMRA,Cy3
फ्लो साइटोमेट्री	सकारात्मक कोशिकाओं के अनुपात के साथ संयुक्त विश्लेषण	FITC,Cy5
संगठनात्मक स्थिति	जानवरों में पेप्टाइड्स के वितरण को देखते हुए	Cy5 (कम ऊतक पृष्ठभूमि)
झल्लाहट अध्ययन	प्रोटीन अंतःक्रियाओं या गठन संबंधी परिवर्तनों का अध्ययन करना	EDANS/DABCYL,Cy3/Cy5
रिसेप्टर बाइंडिंग	आत्मीयता के साथ संयुक्त माप	FITC,FAM
एलिसा	पकड़ना या पता लगाना	बायोटिन
विवो इमेजिंग में	छोटे जानवरों की लाइव इमेजिंग	Cy5,Cy7

वितरण और गुणवत्ता नियंत्रण

डिलिवरी: लियोफिलाइज्ड पाउडर, सेंट्रीफ्यूज ट्यूब या शीशियां (प्रकाश से संरक्षित)
संलग्न दस्तावेज: सीओए (एचपीएलसी शुद्धता ग्राफ, एमएस मास स्पेक्ट्रा), संश्लेषण रिपोर्ट (वैकल्पिक)
वैकल्पिक परीक्षण: पेप्टाइड सामग्री, एंडोटॉक्सिन
अनुकूलित पैकेजिंग: अपनी आवश्यकताओं के अनुसार अलग करें और लेबल करें

प्रत्येक फ्लोरोसेंट और डाई{{0}लेबल वाले पेप्टाइड को भेजने से पहले, हम संपूर्ण डेटा और विश्वसनीय गुणवत्ता सुनिश्चित करने के लिए लेबलिंग, शुद्धता और आणविक भार की समीक्षा करते हैं।

तीन वास्तविक जीवन के मामले

केस 1: एक अनुसंधान संस्थान का सेल-मर्मज्ञ पेप्टाइड कार्यक्रम

The customer was studying a 15 amino acid periplasmic peptide and wanted to see what cells it entered. We synthesized a FITC-labeled periplasmic peptide (N-terminal labeling) with a purity of >95%, और एमएस द्वारा सफल लेबलिंग की पुष्टि की गई। प्रवाह और कन्फोकल माइक्रोस्कोपी का उपयोग करके, ग्राहक स्पष्ट रूप से देख सका कि पेप्टाइड विभिन्न प्रकार की ट्यूमर कोशिकाओं में प्रवेश कर गया था, और झिल्ली की प्रवेश क्षमता स्पष्ट थी।

केस 2: झल्लाहट जांच कार्यक्रम, बायोटेक, इंक

ग्राहक को प्रोटीज़ गतिविधि का पता लगाने के लिए डबल लेबल वाले पेप्टाइड की आवश्यकता थी: एक छोर पर EDANS और दूसरे छोर पर DABCYL, हमने सटीक रूप से Cys{1}}पेप्टाइड{2}}Lys को संश्लेषित किया, और EDANS को Cys (मेनीमाइड विधि) और DABCYL को Lys (NHS एस्टर विधि) से जोड़ा। ग्राहक के परीक्षण से पता चला कि पाचन के बाद प्रतिदीप्ति पुनर्प्राप्ति स्पष्ट थी और जांच प्रदर्शन संतोषजनक था।

केस 3: एक नैदानिक अभिकर्मक कंपनी के लिए एलिसा विकास

The customer was developing an assay that required a biotin-labeled antigenic peptide for antibody capture. We synthesized a biotin-labeled peptide (Cys site-labeled) with purity >95% and biotin ligation efficiency >90%. ग्राहक ने पिकोग्राम संवेदनशीलता के साथ स्ट्रेप्टाविडिन प्लेट का उपयोग करके सफलतापूर्वक एलिसा विधि स्थापित की।

क्या आप फ्लोरोसेंटली लेबल वाली पेप्टाइड आवश्यकताओं के बारे में बात कर रहे हैं?

चाहे आप सेल इमेजिंग, फ्लो, एफआरईटी या एलिसा कर रहे हों, यदि आपको पेप्टाइड्स लेबल करने की आवश्यकता है, तो आप हमसे बात कर सकते हैं।

24 घंटे के भीतर आपको एक विस्तृत उद्धरण और व्यवहार्यता प्रतिक्रिया दें।