फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स

फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स|साइट-सेरीन/थ्रेओनीन/टायरोसिन का विशिष्ट फॉस्फोराइलेशन|उच्च शुद्धता फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स का संश्लेषण|विज्ञान-पेप्टाइड

एंटीबॉडी स्क्रीनिंग, काइनेज विश्लेषण या प्रोटीन इंटरैक्शन के लिए साइट {{0}विशिष्ट फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स की आवश्यकता है? साइंस {{1}पेप्टाइड पेशेवर फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड संश्लेषण सेवा प्रदान करता है, जो पीएसईआर, पीटीएचआर, पीटीवाईआर मल्टी{{2}साइट संयोजन, उच्च शुद्धता, तेज वितरण, साइट पुष्टिकरण का समर्थन करता है। हमसे संपर्क करने के लिए आपका स्वागत है.

प्रोटीन फॉस्फोराइलेशन सबसे आम और महत्वपूर्ण पोस्ट ट्रांसलेशनल संशोधनों में से एक है, जो लगभग सभी जीवन गतिविधियों, जैसे कोशिका चक्र, सिग्नलिंग और जीन अभिव्यक्ति को नियंत्रित करता है। फॉस्फोराइलेशन घटनाओं का अध्ययन करने के लिए, उच्च गुणवत्ता वाले फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स को अक्सर उपकरण के रूप में आवश्यक होता है - चाहे फॉस्फो{3}विशिष्ट एंटीबॉडी की स्क्रीनिंग के लिए या गतिविधि विश्लेषण के लिए काइनेज सब्सट्रेट के रूप में, फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स की शुद्धता और सटीकता प्रयोगात्मक परिणामों की विश्वसनीयता पर सीधा प्रभाव डालती है। पेप्टाइड संश्लेषण में 20 से अधिक वर्षों के अनुभव के आधार पर, केपीटी आपके लिए अनुकूलित साइट विशिष्ट फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स प्रदान करता है। एकल साइट फॉस्फोराइलेशन से लेकर मल्टी {9} साइट संयोजन संशोधन तक, अनुसंधान खुराक के मिलीग्राम से लेकर नैदानिक ​​कच्चे माल के ग्राम तक, हम यह सुनिश्चित करते हैं कि प्रत्येक फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड में सटीक संशोधन साइट, उच्च फॉस्फोराइलेशन दक्षता और बैच {10} से {{11} बैच स्थिरता हो।

फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स संशोधित पेप्टाइड्स होते हैं जिनमें एक फॉस्फेट समूह पेप्टाइड अनुक्रम में विशिष्ट अमीनो एसिड अवशेषों से सहसंयोजक रूप से जुड़ा होता है। फॉस्फोराइलेशन आमतौर पर सेरीन (सेर), थ्रेओनीन (थ्र) और टायरोसिन (टीयर) अवशेषों के हाइड्रॉक्सिल समूहों पर होता है, जिससे फॉस्फो{{1}सेरिन (पीएसईआर), फॉस्फो{2}थ्रेओनीन (पीटीएचआर) और फॉस्फो{3}टायरोसिन (पीटीआईआर) बनता है। इन फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स का उपयोग प्रोटीन की फॉस्फोराइलेशन अवस्था की नकल करने, प्रोटीन संरचना और कार्य पर फॉस्फोराइलेशन के प्रभाव का अध्ययन करने, या फॉस्फोराइलेशन साइटों को पहचानने वाले एंटीबॉडी और बाइंडिंग प्रोटीन की जांच करने के लिए एक उपकरण के रूप में किया जा सकता है।

अनुप्रयोग के आधार पर, फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स को इस प्रकार वर्गीकृत किया जा सकता है:

एकल-साइट फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड:केवल एक विशिष्ट अवशेष को फॉस्फोराइलेट किया जाता है और उस साइट के कार्य का अध्ययन करने के लिए उपयोग किया जाता है।
मल्टी-साइट फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड:प्रोटीन की जटिल संशोधन अवस्था की नकल करते हुए, एकाधिक अवशेषों को एक साथ फॉस्फोराइलेट किया जाता है।

1. साइट-विशिष्ट फास्फारिलीकरण
हम तीन अवशेषों के साथ फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स के संश्लेषण का समर्थन करते हैं: सेरीन, थ्रेओनीन और टायरोसिन। वाणिज्यिक एफएमओसी अमीनो एसिड (फॉस्फो {2 2 संरक्षित) OH मोनोमर्स का उपयोग करके, फॉस्फोराइलेटेड अमीनो एसिड को ठोस चरण संश्लेषण के दौरान सीधे विशिष्ट साइटों में पेश किया जाता है, जिससे संश्लेषण के बाद यादृच्छिक फॉस्फोराइलेशन की अनिश्चितता से बचा जा सकता है। मास स्पेक्ट्रोमेट्री द्वारा प्रत्येक फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड की पुष्टि की गई कि फॉस्फेट समूह सही स्थिति से जुड़ा हुआ था। कई संभावित फॉस्फोराइलेशन साइटों वाले अनुक्रमों के लिए, हम यह सुनिश्चित करने के लिए एक सुरक्षा रणनीति तैयार करने में आपकी सहायता करेंगे कि आपके द्वारा निर्दिष्ट अवशेषों पर संशोधन होता है।

2. मल्टी-साइट कॉम्बिनेटरियल संशोधन
जटिल फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स के लिए जिन्हें कई फॉस्फोराइलेशन साइटों की आवश्यकता होती है, हम यह सुनिश्चित करने के लिए एक ऑर्थोगोनल सुरक्षा रणनीति अपनाते हैं कि प्रत्येक साइट के फॉस्फोराइलेशन को स्वतंत्र रूप से नियंत्रित किया जा सकता है। उदाहरण के लिए, हमने एक ग्राहक के लिए 13-पेप्टाइड को संश्लेषित किया है जिसमें pSer और pTyr दोनों शामिल हैं, और दोनों साइटें बिना किसी रिसाव के पूरी तरह से फॉस्फोराइलेट की गईं। भले ही फॉस्फोराइलेशन साइटें एक-दूसरे से सटे हों या उन क्षेत्रों में स्थित हों जिन्हें संश्लेषित करना मुश्किल है, हमारे पास परिपक्व अनुकूलन समाधान हैं।

3. उच्च शुद्धता और पूर्ण लक्षण वर्णन
प्रत्येक फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड को एचपीएलसी द्वारा लक्ष्य शुद्धता तक शुद्ध किया गया था और मास स्पेक्ट्रोमेट्री (एमएस) द्वारा सही आणविक भार की पुष्टि की गई थी। एकाधिक फॉस्फोराइलेशन साइटों वाले पेप्टाइड्स के लिए, हम टुकड़े आयनों द्वारा प्रत्येक फॉस्फोराइलेशन साइट के स्थान को सत्यापित करने के लिए एमएस/एमएस माध्यमिक द्रव्यमान स्पेक्ट्रोमेट्री डेटा प्रदान करते हैं। शुद्धता, आणविक भार, मास स्पेक्ट्रोमेट्री, फॉस्फोराइलेशन साइटों की पुष्टि और भंडारण सिफारिशों सहित एक विस्तृत सीओए रिपोर्ट वितरित की जाती है।

4. अन्य संशोधनों के साथ संगत
फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स को अन्य संशोधनों (उदाहरण के लिए, बायोटिन, फ्लोरोसेंट लेबलिंग, पेगीलेशन, आदि) के साथ एक साथ पेश किया जा सकता है। उदाहरण के लिए, बायोटिन लेबल वाले फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स का उपयोग फॉस्फोराइलेटेड बाइंडिंग प्रोटीन को पकड़ने के लिए पुल डाउन एसेज़ में किया जा सकता है; फ्लोरोसेंटली लेबल वाले फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स का उपयोग काइनेज गतिविधि की वास्तविक समय पर निगरानी के लिए किया जा सकता है; और स्थिर आइसोटोप लेबल वाले फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स का उपयोग मास स्पेक्ट्रोमेट्री मात्रा निर्धारण के लिए आंतरिक मानक के रूप में किया जा सकता है।

1. फॉस्फो-विशिष्ट एंटीबॉडी स्क्रीनिंग
फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स फॉस्फो - विशिष्ट एंटीबॉडी की तैयारी और स्क्रीनिंग के लिए प्रमुख उपकरण हैं। एलिसा या माइक्रोएरे स्क्रीनिंग में गैर-फॉस्फोराइलेटेड नियंत्रण पेप्टाइड्स के साथ फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स का उपयोग करके, केवल फॉस्फोराइलेटेड रूप को पहचानने वाले एंटीबॉडी को कुशलतापूर्वक प्राप्त किया जा सकता है। हमने कई एंटीबॉडी कंपनियों को उनके एंटीबॉडी विकास कार्यक्रमों के लिए उच्च शुद्धता वाले फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स प्रदान किए हैं, और कुछ एंटीबॉडी लोकप्रिय अनुसंधान उपकरण बन गए हैं।

2. किनेज़ गतिविधि का विश्लेषण
फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स का उपयोग किनेज़ गतिविधि का पता लगाने, किनेज़ अवरोधकों की स्क्रीनिंग या किनेज़ सब्सट्रेट विशिष्टता के अध्ययन के लिए किनेज़ सब्सट्रेट के रूप में किया जा सकता है। उदाहरण के लिए, फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स को फॉस्फो{1}}विशिष्ट एंटीबॉडी या रेडियोलेबलिंग के साथ संयोजन में मानकों के रूप में उपयोग करके काइनेज गतिविधि में परिवर्तन की मात्रा निर्धारित की जा सकती है। हमारे फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स बैच दर बैच स्थिर हैं और उच्च थ्रूपुट स्क्रीनिंग के लिए उपयुक्त हैं।

3. प्रोटीन अंतःक्रिया अध्ययन
कई सिग्नलिंग पाथवे प्रोटीन विशिष्ट फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड रूपांकनों को पहचानकर परस्पर क्रिया करते हैं। जांच के रूप में फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स का उपयोग करके, पुल{1}डाउन या एसपीआर तकनीकों के साथ मिलकर, नए फॉस्फोराइलेशन{{2}निर्भर बाध्यकारी प्रोटीन की पहचान की जा सकती है। हमने एक क्लाइंट के लिए फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स युक्त पीटीवाईआर की एक श्रृंखला को संश्लेषित किया है और उनका उपयोग उनके एसएच 2 डोमेन की बाइंडिंग विशिष्टता को स्क्रीन करने के लिए किया है, और कई नए इंटरैक्शन की सफलतापूर्वक पहचान की है।

4. सेलुलर सिग्नलिंग मार्गों पर अनुसंधान
विशिष्ट सिग्नलिंग मार्गों की सक्रियता की नकल करने और डाउनस्ट्रीम प्रभावों का अध्ययन करने के लिए फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स को कोशिकाओं में पेश किया जा सकता है (उदाहरण के लिए, माइक्रोइंजेक्शन या लिपोसोमल ट्रांसफ़ेक्शन द्वारा)। उदाहरण के लिए, फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स युक्त पीएसईआर का उपयोग 14{6}}3-3 प्रोटीन के बंधन पर कार्यात्मक परिवर्तनों की नकल करने के लिए किया जा सकता है। हम सेलुलर प्रयोगों में सीधे उपयोग के लिए सेल-मर्मज्ञ पेप्टाइड अनुक्रमों के साथ फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स प्रदान कर सकते हैं।

5. मास स्पेक्ट्रोमेट्री मात्रात्मक आंतरिक मानक
फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स लेबल वाले स्थिर आइसोटोप का उपयोग मास स्पेक्ट्रोमेट्री द्वारा मात्रात्मक फॉस्फोराइलेशन प्रोटिओमिक्स अध्ययन के लिए आंतरिक मानकों के रूप में किया जा सकता है। हम पूर्ण मात्रा निर्धारण के लिए ¹³C/¹⁵N{{1}लेबल वाले अमीनो एसिड युक्त फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स प्रदान कर सकते हैं और प्राकृतिक पेप्टाइड्स के साथ सह-उत्सर्जन की गारंटी दे सकते हैं।

6. वैक्सीन और नैदानिक ​​अभिकर्मक विकास
कुछ रोग स्थितियाँ विशिष्ट फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स के विरुद्ध स्वप्रतिपिंडों का उत्पादन करती हैं। फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स का उपयोग इन ऑटोएंटीबॉडी का पता लगाने और रोग निदान में सहायता के लिए एंटीजन के रूप में किया जा सकता है। हमने किट विकास में उपयोग के लिए कई नैदानिक ​​कंपनियों को फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स की आपूर्ति की है, और उनमें से कुछ ने पहले ही चिकित्सा उपकरण पंजीकरण प्रमाणपत्र प्राप्त कर लिया है।

1. आवश्यकताओं का संचार
आप पेप्टाइड अनुक्रम, फॉस्फोराइलेशन साइट (जिसे सेर/थ्र/टायर फॉस्फोराइलेट किया जाना चाहिए), शुद्धता की आवश्यकताएं और खुराक प्रदान करते हैं। हम अनुक्रम विशेषताओं के आधार पर संश्लेषण कठिनाई का मूल्यांकन करेंगे और सबसे उपयुक्त फॉस्फोराइलेशन रणनीति (जैसे एकल साइट, एकाधिक साइट, एनालॉग चयन इत्यादि) की सिफारिश करेंगे।

2. सिंथेटिक डिज़ाइन
उपयुक्त सुरक्षा रणनीतियों का चयन. पारंपरिक फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स के लिए, हमने व्यावसायिक रूप से उपलब्ध मोनोमर्स जैसे कि Fmoc -Ser(PO(OBzl)OH)-OH, Fmoc{3}}Thr(PO(OBzl)OH){{4}OH, और Fmoc{5}Tyr(PO(OBzl)OH){6}}OH का उपयोग किया, जिन्हें सीधे ठोस चरण संश्लेषण के दौरान पेश किया गया था। मल्टी-साइट फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स के लिए, प्रत्येक साइट के पूर्ण फॉस्फोराइलेशन को सुनिश्चित करने और साइड प्रतिक्रियाओं से बचने के लिए प्रतिक्रिया स्थितियों को अनुकूलित किया जाना चाहिए।

3. पेप्टाइड संश्लेषण
पेप्टाइड श्रृंखला को ठोस चरण संश्लेषण द्वारा चरणबद्ध तरीके से इकट्ठा किया गया था। सुरक्षात्मक समूहों के साथ फॉस्फोराइलेटेड अमीनो एसिड सीधे उन स्थानों पर जुड़े हुए थे जहां फॉस्फोराइलेशन की आवश्यकता थी। फॉस्फोरिल समूहों के बहाव से बचने के लिए संश्लेषण प्रक्रिया के दौरान प्रतिक्रिया की स्थिति (उदाहरण के लिए, युग्मन समय और तापमान) को सख्ती से नियंत्रित किया गया था। लंबे पेप्टाइड्स या अघुलनशील पेप्टाइड्स के लिए, हम दक्षता में सुधार के लिए माइक्रोवेव सहायता प्राप्त संश्लेषण या विशेष सॉल्वैंट्स का उपयोग करते हैं।

4. काटना एवं संरक्षण
पेप्टाइड्स को एक स्कैवेंजर युक्त कटिंग सॉल्यूशन का उपयोग करके राल से काटा जाता है, जो दोनों तरफ की श्रृंखला की रक्षा करने वाले समूहों और फॉस्फेट की रक्षा करने वाले समूहों को हटा देता है। एसिड के प्रति संवेदनशील फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स के लिए, फॉस्फेट समूहों के नुकसान को कम करने के लिए काटने की स्थिति (उदाहरण के लिए, टीएफए एकाग्रता में कमी, मैला ढोने वालों को जोड़ना) को अनुकूलित करने की आवश्यकता है।

5. शुद्धि
कच्चे पेप्टाइड को प्रारंभिक एचपीएलसी द्वारा लक्ष्य शुद्धता तक शुद्ध किया गया था। एकाधिक फॉस्फोराइलेशन साइटों वाले पेप्टाइड्स के लिए, विभिन्न फॉस्फोराइलेशन राज्यों वाले उत्पादों को पृथक्करण के लिए ग्रेडिएंट के सावधानीपूर्वक अनुकूलन की आवश्यकता हो सकती है। हम यह सुनिश्चित करने के लिए एमएस ऑनलाइन मॉनिटरिंग का उपयोग करते हैं कि लक्षित उत्पाद एकत्र किए गए हैं।

6. गुणवत्ता नियंत्रण
एचपीएलसी विश्लेषण: पुष्टि करें कि शुद्धता आवश्यकताओं को पूरा करती है, क्रोमैटोग्राम प्रदान करें।
मास स्पेक्ट्रोमेट्री (एमएस): सत्यापित करें कि आणविक भार सही है, पुष्टि करें कि फॉस्फोराइलेशन सफल है, और एक मास स्पेक्ट्रम प्रदान करें।

7. डिलिवरी
संश्लेषण लॉट संख्या, शुद्धता, आणविक भार, द्रव्यमान स्पेक्ट्रा, भंडारण की स्थिति और उपयोग की सिफारिशों सहित लियोफिलाइज्ड पाउडर और विस्तृत सीओए रिपोर्ट प्रदान करें। प्रकाशन या रिपोर्टिंग के लिए सभी डेटा का पता लगाया जा सकता है।

1. फॉस्फोराइलेशन में व्यापक अनुभव
हमने हजारों फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स को सफलतापूर्वक संश्लेषित किया है, जिनमें एकल {{0} साइट, मल्टी {{1} साइट, प्राकृतिक और गैर {{2} प्राकृतिक एनालॉग शामिल हैं। फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स को संश्लेषित करना मुश्किल है (उदाहरण के लिए लगातार कई फॉस्फोराइलेशन साइटें, अत्यधिक हाइड्रोफोबिक, माध्यमिक संरचना गठन की संभावना आदि), हमारे पास एक परिपक्व अनुकूलन योजना है, और सफलता दर उद्योग के औसत से बहुत अधिक है।

2. उत्पादन के लचीले पैमाने
हम अनुसंधान के लिए मिलीग्राम से लेकर औद्योगिक उपयोग के लिए ग्राम तक स्थिर मात्रा में उत्पादन करने में सक्षम हैं। लंबी अवधि की आपूर्ति की आवश्यकता वाली परियोजनाओं के लिए, हम बैच {{2}से {{3} बैच स्थिरता सुनिश्चित करने के लिए बैच समझौतों पर हस्ताक्षर कर सकते हैं (हम कई बैचों के लिए एचपीएलसी/एमएस तुलना डेटा प्रदान कर सकते हैं)। हम कई वर्षों से कई फार्मास्युटिकल कंपनियों को सीवी के साथ उनके ड्रग स्क्रीनिंग प्लेटफॉर्म के लिए फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड्स की आपूर्ति कर रहे हैं।<5%.

3. तीव्र वितरण
नियमित फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड ऑर्डर (लंबाई<20 aa, single site phosphorylation) can be completed within 12-18 business days. Expedited service can be negotiated to 7-10 working days. For urgent projects, we can coordinate resources for priority arrangement.

4. व्यावसायिक तकनीकी सहायता
हमारे सभी परियोजना प्रबंधकों के पास पेप्टाइड रसायन विज्ञान की पृष्ठभूमि है और वे आपको फॉस्फोराइलेशन साइट चयन, एनालॉग अनुशंसा और एप्लिकेशन सुझाव प्रदान कर सकते हैं। कई ग्राहकों ने बताया है कि हमारी सलाह ने उन्हें कई सामान्य प्रयोगात्मक नुकसानों से बचने में मदद की है (उदाहरण के लिए अनुपयुक्त फॉस्फोराइलेशन एनालॉग चुनना, खराब साइट डिज़ाइन जिसके कारण संश्लेषण कठिनाइयां होती हैं, आदि)।

चाहे आपको एंटीबॉडी स्क्रीनिंग के लिए एक साधारण सिंगल साइट फॉस्फोराइलेटेड पेप्टाइड की आवश्यकता हो या सिग्नलिंग पाथवे अनुसंधान के लिए एक जटिल मल्टी साइट कॉम्बिनेशन पेप्टाइड की, केपीटी बायोटेक हमेशा तकनीकी विशेषज्ञता और कठोर रवैये के साथ आपकी सेवा करने के लिए तैयार है। यह सुनिश्चित करने के लिए कि डिज़ाइन आपकी प्रयोगात्मक आवश्यकताओं से पूरी तरह मेल खाता है, हमारी टीम आपके प्रोजेक्ट की शुरुआत से पहले आपके साथ चर्चा करने में प्रसन्न होगी।