टी-सेल ट्रंकेटेड लाइब्रेरी|टी-सेल एपिटोप ठीक स्थानीयकरण|न्यूनतम एपिटोप स्क्रीनिंग|इम्यून पेप्टाइड लाइब्रेरी|विज्ञान-पेप्टाइड
पृष्ठ विवरण (मेटा विवरण)
T-सेल एपिटोप्स के न्यूनतम कोर अनुक्रम के सटीक स्थानीयकरण की आवश्यकता है? विज्ञान -पेप्टाइड टी{{5}सेल प्रतिरक्षा अनुसंधान का समर्थन करने के लिए तेजी से वितरण के साथ, पेशेवर टी{2}}सेल ट्रंकेटेड लाइब्रेरी संश्लेषण सेवाएं प्रदान करता है, जो एन{{3}टर्मिनस, सी{4}}टर्मिनस, या दोनों सिरों से चरण दर चरण काट-छांट की जाती है। पूछताछ करने के लिए आपका स्वागत है.
टी-सेल एपिटोप अनुसंधान: सबसे छोटे को ढूंढना अक्सर सबसे महत्वपूर्ण होता है
T-सेल ट्रंकेटेड लाइब्रेरी क्या है?
जो लोग टी-सेल प्रतिरक्षा अनुसंधान करते हैं वे जानते हैं कि सकारात्मक पेप्टाइड की जांच करना केवल पहला कदम है। अगला सवाल यह है: क्या संपूर्ण पेप्टाइड या सिर्फ एक छोटा सा खंड वास्तव में टी कोशिकाओं द्वारा पहचाना जाता है?
इस प्रश्न का उत्तर देने के लिए T-सेल ट्रंकेटेड लाइब्रेरी का उपयोग किया जाता है। प्रारंभिक स्क्रीनिंग से प्राप्त सकारात्मक लंबे पेप्टाइड से शुरू करते हुए, अमीनो एसिड को एन -टर्मिनस, सी-टर्मिनस, या दोनों सिरों से चरण दर चरण विभाजित किया जाता है, जिससे तेजी से छोटे पेप्टाइड्स की एक श्रृंखला बनती है। फिर, प्रत्येक का परीक्षण करने के लिए T-सेल फ़ंक्शन प्रयोगों का उपयोग किया जाता है जब तक कि "सबसे छोटा संस्करण" जो अभी भी T कोशिकाओं को सक्रिय कर सकता है, नहीं मिल जाता।
यह सबसे छोटा संस्करण मूल एपिटोप है जिसे टी कोशिकाएं वास्तव में पहचानती हैं।
काट-छाँट क्यों?
- सटीक स्थानीयकरण: एमएचसी अणु प्रस्तुति और टीसीआर मान्यता के लिए मुख्य अनुक्रम की पहचान करना
- तंत्र अनुसंधान: एपिटोप प्रसंस्करण और प्रस्तुति की सीमा आवश्यकताओं को समझना
- वैक्सीन अनुकूलन: अप्रासंगिक अनुक्रमों से हस्तक्षेप से बचने के लिए सबसे कम प्रभावी अनुक्रमों के साथ टीके डिजाइन करना
- नैदानिक विकास: जांच अभिकर्मकों की विशिष्टता में सुधार

हम क्या कर सकते हैं?
1. विभिन्न अनुसंधान आवश्यकताओं को पूरा करने के लिए एकाधिक ट्रंकेशन विधियां
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काट-छाँट के तरीके |
स्पष्टीकरण |
लागू परिदृश्य |
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एन-टर्मिनल ट्रंकेशन |
एन-टर्मिनस से एक-एक करके अमीनो एसिड को तोड़ें |
N-टर्मिनल सीमा निर्धारित करें |
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सी-टर्मिनल ट्रंकेशन |
सी-टर्मिनस से एक-एक करके अमीनो एसिड को तोड़ें |
C-टर्मिनल सीमा निर्धारित करें |
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दोनों सिरों पर कटाव |
दोनों सिरों पर एक साथ काट-छाँट |
सटीक स्थानीयकरण के लिए सीमा को तेजी से कम करना |
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असमान चरण आकार कटाव |
बड़ा-पहले मोटे चरण की स्क्रीनिंग, फिर ठीक-चरण का सटीक स्थानीयकरण |
लंबे पेप्टाइड्स की प्रारंभिक जांच, समय और लागत की बचत |
2. लाइब्रेरी डिज़ाइन: सकारात्मक पेप्टाइड्स से न्यूनतम एपिटोप्स तक
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पैरामीटर |
स्पष्टीकरण |
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पेरेंट पेप्टाइड लंबाई |
आमतौर पर 8-25 अमीनो एसिड (टी सेल एपिटोप स्क्रीनिंग के लिए सामान्य लंबाई) |
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काट-छाँट के तरीके |
एन-टर्मिनस, सी-टर्मिनस, या दोनों |
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ट्रंकेशन चरण का आकार |
आम तौर पर, एक समय में 1 अमीनो एसिड को छोटा करें, या बड़े चरणों से शुरू करें और फिर छोटे चरणों से शुरू करें |
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न्यूनतम लंबाई |
आमतौर पर, 5-9 अमीनो एसिड (एमएचसी क्लास I एपिटोप्स) या 9-15 (एमएचसी क्लास II एपिटोप्स) बरकरार रहते हैं। |
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पेप्टाइड को नियंत्रित करें |
मूल पेप्टाइड अनुक्रम (सकारात्मक नियंत्रण), अप्रासंगिक पेप्टाइड (नकारात्मक नियंत्रण) |
उदाहरण: प्रारंभिक स्क्रीनिंग से प्राप्त 15 अमीनो एसिड वाला एक सकारात्मक पेप्टाइड, और हम सबसे छोटे एपिटोप को निर्धारित करने के लिए एन -टर्मिनल ट्रंकेशन करना चाहते हैं।
प्रसंग 1: पहली स्थिति हटाएँ (14मेर)
एपिटोप 2: पहले दो स्थान हटाएं (13मेर)
एपीटोप 3: पहले तीन स्थान हटाएँ (12मेर)
जब तक 5-6 अमीनो एसिड बरकरार न रह जाएं
3. सिंथेटिक क्षमता
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परियोजना |
क्षमता |
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पेप्टाइड लंबाई |
5-25 अमीनो एसिड (छंटनी के बाद) |
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पुस्तकालय का आकार |
10-50 पेप्टाइड्स (मूल पेप्टाइड की लंबाई और ट्रंकेशन विधि के आधार पर) |
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शुद्धता विकल्प |
क्रूड (70-85%), नियमित शुद्धता (85-95%), उच्च शुद्धता (95-98%) |
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पेप्टाइड प्रति उपज |
0.5-5 मिलीग्राम (आमतौर पर टी सेल प्रयोगों के लिए पर्याप्त) |
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वितरण विधि |
96-वेल प्लेट, सिंगल सेंट्रीफ्यूज ट्यूब, शीशी |
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चक्र |
20 पेप्टाइड्स तक 2-3 सप्ताह |
4. गुणवत्ता नियंत्रण: प्रत्येक पेप्टाइड के लिए डेटा उपलब्ध है
हम प्रत्येक पेप्टाइड को T-सेल ट्रंकेटेड लाइब्रेरी में प्रदान करते हैं:
एमएस मास स्पेक्ट्रोमेट्री: सही आणविक भार की पुष्टि करता है
एचपीएलसी शुद्धता: कच्चे या शुद्ध उत्पादों के लिए शुद्धता डेटा
सीओए रिपोर्ट: प्रति पेप्टाइड एक रिपोर्ट, लंबाई या ट्रंकेशन विधि द्वारा खोजी जा सकती है
वैकल्पिक सेवाएँ:
पेप्टाइड सामग्री निर्धारण: सटीक मात्रा निर्धारण के लिए, यह उपलब्ध है
घुलनशीलता परीक्षण: अनुशंसित उपयुक्त सॉल्वैंट्स (डीएमएसओ, पीबीएस, आदि)
एंडोटॉक्सिन का पता लगाना: सेल प्रयोगों में उपयोग किया जाता है, यह सुनिश्चित करते हुए कि कोई हस्तक्षेप न हो
अपनी T-सेल ट्रंकेटेड लाइब्रेरी के लिए हमें क्यों चुनें?
1. हम 20 वर्षों से ऐसा कर रहे हैं
एटी-सेल ट्रंकेटेड लाइब्रेरी "तेजी से छोटे पेप्टाइड्स का एक बैच" की तरह लगती है, लेकिन यह सुनिश्चित करना कि प्रत्येक पेप्टाइड सही है, पर्याप्त शुद्धता का है, और समय पर वितरित किया गया है, इसमें कई विवरण शामिल हैं। इन वर्षों में, हमने ग्राहकों को एमएचसी वर्ग I से लेकर एमएचसी वर्ग II तक, चूहों से लेकर मनुष्यों तक, विभिन्न संक्षिप्त पुस्तकालय बनाने में मदद की है, और यह प्रक्रिया पहले से ही अच्छी तरह से स्थापित हो चुकी है।
2. लचीली ट्रंकेशन विधियां, आपके प्रयोगात्मक डिज़ाइन को समझती हैं
कुछ कंपनियाँ केवल एक छोर को छोटा करना जानती हैं, और जब वे विधि को बदलने का प्रयास करती हैं तो उन्हें पता नहीं चलता है। हम अलग - अलग है:
एन-टर्मिनल ट्रंकेशन: मानक प्रक्रिया
सी-टर्मिनल ट्रंकेशन: समान रूप से कुशल
दोनों सिरों पर छोटा करना: संयोजन पुस्तकालयों के डिजाइन की अनुमति देता है
दो {{0}चरणीय काट-छांट: सबसे पहले, एक बड़े पैमाने पर मोटे तौर पर स्क्रीनिंग (हर बार 2{3}}3 टुकड़े काटना), फिर गतिविधि की सीमा खोजने के बाद एक अच्छा {{4}कदम सटीक स्थिति निर्धारण करना, जिससे पैसे और समय की बचत होती है
3. आवश्यकतानुसार पवित्रता, अनावश्यक खर्चों से बचना
टी सेल प्रयोगों में शुद्धता की कुछ आवश्यकताएँ होती हैं, लेकिन उच्चतर हमेशा बेहतर नहीं होता है।
अपरिष्कृत उत्पाद (70-85%): प्रारंभिक स्क्रीनिंग के लिए उपयोग किया जाता है, पहले जांच की जाती है कि किस लंबाई में अभी भी गतिविधि है, जिससे पैसे की बचत होती है।
पारंपरिक शुद्धता (85-95%): अधिकांश टी सेल प्रयोगों (ELISPOT, ICS) के लिए उपयुक्त, लागत प्रभावी।
उच्च शुद्धता (95-98%): सटीक मात्रा निर्धारण या संरचनात्मक अध्ययन की आवश्यकता होती है, जिसके परिणामस्वरूप अधिक स्थिर परिणाम मिलते हैं।
4. संपूर्ण डेटा, प्रकाशन की कोई चिंता नहीं
मैंने एक्सेल में व्यवस्थित प्रत्येक पेप्टाइड के लिए एमएस और एचपीएलसी डेटा प्रदान किया है। यह स्पष्ट रूप से दिखाता है कि कौन सा पेप्टाइड किस लंबाई से मेल खाता है, इसकी शुद्धता और आणविक भार सही है या नहीं। आप स्वयं व्यवस्थित किए बिना अपने पेपर में पूरक जानकारी शामिल कर सकते हैं।
5. एंडोटॉक्सिन नियंत्रण की आवश्यकता है? हम यह कर सकते हैं
टी सेल प्रयोग एंडोटॉक्सिन के प्रति संवेदनशील हैं। हम यह सुनिश्चित करने के लिए एंडोटॉक्सिन परीक्षण सेवाएं प्रदान कर सकते हैं कि प्रत्येक पेप्टाइड का एंडोटॉक्सिन स्तर 0.1 ईयू/मिलीग्राम से कम है, जो सेल फ़ंक्शन को प्रभावित नहीं करता है।
6. स्क्रीनिंग से लेकर सत्यापन तक, हम हर तरह से आपका अनुसरण करते हैं
न्यूनतम एपिटोप खोजने के बाद, अक्सर अधिक अनुवर्ती कार्य की आवश्यकता होती है: जैसे एमएचसी टेट्रामर्स को संश्लेषित करना, संरचनात्मक अध्ययन करना, और टी-सेल रिसेप्टर्स विकसित करना। विज्ञान {{3}पेप्टाइड इन चरणों को एक ही प्रोजेक्ट, एक ही संपर्क व्यक्ति, पुन: समायोजन की आवश्यकता के बिना, निर्बाध रूप से जोड़ सकता है।
टी-सेल एपिटोप ट्रंकेटेड लाइब्रेरी का उपयोग कहाँ किया जाता है?
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अनुसंधान क्षेत्र |
अनुप्रयोग |
अनुशंसित काट-छाँट विधियाँ |
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संक्रमण प्रतिरोधक क्षमता |
वायरल या बैक्टीरियल एंटीजन के न्यूनतम टी - सेल एपिटोप की पहचान करने के लिए |
एन-टर्मिनल + सी-टर्मिनल ट्रंकेशन |
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ट्यूमर प्रतिरक्षा |
नियोएंटीजन के मूल एपिटोप का सटीक रूप से पता लगाना |
दोनों सिरों पर कटाव |
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ऑटोइम्यून बीमारियाँ |
स्वंय -प्रतिक्रियाशील टी{{1}सेल पहचान के लिए मूल अनुक्रम की पहचान करना |
एन-टर्मिनल ट्रंकेशन या सी-टर्मिनल ट्रंकेशन |
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टीका विकास |
सबसे कम प्रभावी एपिटोप का उपयोग करके टीके डिजाइन करना |
दोनों सिरों पर कटाव |
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टी-सेल रिसेप्टर अनुसंधान |
टीसीआर मान्यता अनुसंधान के लिए न्यूनतम आवश्यकताएँ |
एन-टर्मिनल + सी-टर्मिनल ट्रंकेशन |
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प्रतिरक्षा निगरानी |
एपिटोप-विशिष्ट पहचान विधियों का विकास करना |
न्यूनतम एपिटोप निर्धारित करने के बाद संश्लेषण |
वितरण और गुणवत्ता नियंत्रण
डिलिवरी प्रारूप:
96-वेल प्लेट (प्रति कुएं एक पेप्टाइड, लियोफिलाइज्ड पाउडर, ट्रंकेशन विधि और लंबाई के साथ लेबल किया गया)
या व्यक्तिगत सेंट्रीफ्यूज ट्यूब रीपैकेजिंग (मांग पर)
अंकन जानकारी: ट्रंकेशन विधि, लंबाई, अनुक्रम, आणविक भार, शुद्धता
साथ में दस्तावेज़:
एक्सेल सारांश तालिका (अनुक्रम, मेगावाट, शुद्धता, सभी पेप्टाइड्स के लिए एमएस फ़ाइल लिंक)
प्रत्येक पेप्टाइड के लिए व्यक्तिगत सीओए (पीडीएफ)।
लाइब्रेरी डिज़ाइन सारांश रिपोर्ट (प्रत्येक पेप्टाइड के लिए ट्रंकेशन विधि और लंबाई की व्याख्या)
वैकल्पिक: एंडोटॉक्सिन का पता लगाना, घुलनशीलता डेटा, पेप्टाइड सामग्री निर्धारण
प्रत्येक टी-सेल ट्रंकेटेड लाइब्रेरी को भेजने से पहले, हम यह सुनिश्चित करने के लिए इसकी जांच करते हैं कि ट्रंकेशन विधि सही है, पेप्टाइड संख्या सही है, और डेटा पूरा है।



तीन वास्तविक -विश्व मामले
केस 1: एक अनुसंधान संस्थान में वायरल संक्रमण परियोजना
A client used an overlapping peptide library to screen out a 15-amino acid T-cell epitope and wanted to determine the minimal core sequence. We synthesized N-terminal truncated libraries (from 15mer to 7mer) and C-terminal truncated libraries (from 15mer to 7mer), totaling 18 peptides with a purity >90%. ग्राहक ने ELISPOT परीक्षण का उपयोग किया और पाया कि 5-12 स्थिति पर 8 अमीनो एसिड पेप्टाइड्स अभी भी टी कोशिकाओं को सक्रिय कर सकते हैं; कोई भी छोटा पेप्टाइड अप्रभावी था, जो कोर एपिटोप का सटीक रूप से पता लगा रहा था।
केस 2: एक ट्यूमर इम्यूनोलॉजी कंपनी में नियोएंटीजन प्रोजेक्ट
ग्राहक ने एक मरीज के ट्यूमर के नमूने से एक उत्परिवर्तन {{0}व्युत्पन्न टी - सेल एपिटोप की पहचान की, जो 13 अमीनो एसिड का एक लंबा पेप्टाइड है। हमने एक असमान चरण वाली ट्रंकेशन रणनीति तैयार की है: सबसे पहले एक मोटे स्क्रीनिंग लाइब्रेरी (7 पेप्टाइड्स) को संश्लेषित किया गया है, जिसमें प्रत्येक एन {6}टर्मिनस और सी{7}टर्मिनस पर दो पेप्टाइड्स को विभाजित किया गया है; गतिविधि सीमा का पता लगाने के बाद, गतिविधि सीमा के निकट प्रत्येक चरण पर एक पेप्टाइड के साथ एक सटीक स्थानीयकरण लाइब्रेरी (6 पेप्टाइड्स)। कुल 13 पेप्टाइड्स के दो बैच 3 सप्ताह में वितरित किए गए। क्लाइंट ने आईसीएस का उपयोग करके परिणामों को मान्य किया, अंततः 9 अमीनो एसिड के एक कोर एपिटोप का पता लगाया।
केस 3: ऑटोइम्यून रोग अनुसंधान परियोजना
टाइप 1 मधुमेह में ऑटोरिएक्टिव टी कोशिकाओं पर शोध कर रहे क्लाइंट ने 12 - अमीनो एसिड पॉजिटिव पेप्टाइड की पहचान की थी और इसके मूल एपिटोप को निर्धारित करना चाहता था। हमने एन-टर्मिनल ट्रंकेटेड लाइब्रेरीज़ (12एमईआर से 6एमईआर) और सी-टर्मिनल ट्रंककेटेड लाइब्रेरीज़ (12एमईआर से 6एमईआर) को संश्लेषित किया, कुल 14 पेप्टाइड्स, और एंडोटॉक्सिन का पता लगाने की सुविधा प्रदान की (<0.1 EU/mg). The client used T cell proliferation experiments and found that the 8 amino acid peptides at positions 3-10 retained activity; subsequently, tetramer staining was performed using this minimal epitope.
आइए आपकी टी-सेल ट्रंकेटेड लाइब्रेरी आवश्यकताओं के बारे में बात करें?
चाहे आपको वायरल एपिटोप्स, ट्यूमर नियोएंटीजन, या ऑटोइम्यून लक्ष्यों को लक्षित करने की आवश्यकता हो, हम आपको उच्च गुणवत्ता वाली टी - सेल ट्रंकेटेड लाइब्रेरीज़ को डिज़ाइन और संश्लेषित करने में मदद कर सकते हैं।
आपको मुझे क्या बताना है:
पेरेंट पेप्टाइड अनुक्रम (प्रारंभिक स्क्रीनिंग से प्राप्त सकारात्मक पेप्टाइड्स)
मूल पेप्टाइड लंबाई और ज्ञात जानकारी (एमएचसी प्रकार, आदि)
ट्रंकेशन विधि (एन-टर्मिनल, सी-टर्मिनल, या दोनों सिरे)
ट्रंकेशन रणनीति (एक या दो बार में एक पेप्टाइड काटें-चरणीय विधि)
न्यूनतम अवधारण लंबाई
प्रत्येक पेप्टाइड के लिए आवश्यक मात्रा
शुद्धता आवश्यकताएँ
क्या एंडोटॉक्सिन जांच आवश्यक है?
वितरण प्रारूप (प्लेट या ट्यूब)
आपको इसकी आवश्यकता कब है?
हम आपको 24 घंटे के भीतर एक कोटेशन और डिलीवरी शेड्यूल देंगे।