तिर्ज़ेपेटाइड अशुद्धियाँ

तिर्ज़ेपेटाइड अशुद्धियाँ|टिलपेप्टाइड अशुद्धता नियंत्रण|अशुद्धता कस्टम संश्लेषण और संरचना पुष्टिकरण|विज्ञान-पेप्टाइड

 

 

जीएलपी के लिए तिरजेपेटाइड अशुद्धियाँ नियंत्रण - डेटा. हमसे संपर्क करने के लिए आपका स्वागत है.

 

 

 

 

टिल्पेप्टाइड की आणविक संरचना यह निर्धारित करती है कि इसकी अशुद्धता प्रोफ़ाइल सामान्य पेप्टाइड्स की तुलना में बहुत अधिक जटिल है। जब हम अशुद्धता अध्ययन करते हैं, तो हम मुख्य रूप से इन श्रेणियों पर ध्यान केंद्रित करते हैं:

 

गायब पेप्टाइड
39 अमीनो एसिड, जिनमें से कोई भी संश्लेषण प्रक्रिया के दौरान छूट जाता है, एक अशुद्धता है। एचपीएलसी पर लापता पेप्टाइड्स का अवधारण समय व्यापक रूप से वितरित किया गया था, जिसमें विभिन्न स्थितियों में लापता पेप्टाइड्स की अलग-अलग ध्रुवता थी। कुछ एन-टर्मिनस पर गायब हैं, कुछ मध्य में, और कुछ फैटी एसिड लगाव स्थल के पास गायब हैं। हमें एक ग्राहक से उनकी प्रक्रिया में सभी संभावित लापता अशुद्धियों को स्थानीयकृत करने के लिए विभिन्न स्थितियों में 15 लापता पेप्टाइड्स का ऑर्डर मिला है।

 

ऑक्सीकरण अशुद्धियाँ
टिल्पेप्टाइड के क्रम में मिले पदार्थ सल्फ़ोक्साइड और फिर सल्फ़ोन में ऑक्सीकरण के प्रति संवेदनशील होते हैं। ऑक्सीकृत अशुद्धियाँ अक्सर स्थिरता अध्ययन में दिखाई देती हैं और कुछ समय के बाद बढ़ती हैं। हमने तुलना की है, एक महीने के लिए त्वरित परिस्थितियों में, ऑक्सीकरण शिखर बिना किसी नियंत्रण के 0.3% से अधिक तक बढ़ सकता है।

 

फैटी एसिड शेडिंग उत्पाद
यह टिल्पेप्टाइड के लिए अद्वितीय अशुद्धता है। इसकी फैटी एसिड साइड चेन (इकोसानेडियोइक एसिड) एक लिंकर के माध्यम से लाइसिन से जुड़ी होती है, और यह संशोधन संश्लेषण या भंडारण के दौरान आंशिक रूप से बहाया जा सकता है, जिसके परिणामस्वरूप फैटी एसिड अशुद्धियों को हटा देता है। अधिक समस्याग्रस्त रूप से, फैटी एसिड और लिंकर के बीच, या लिंकर और पेप्टाइड - के बीच अलग-अलग स्थानों पर बहाव हो सकता है, जिसके परिणामस्वरूप अलग-अलग अशुद्धियाँ होती हैं। हमने अपने ग्राहकों के लिए कई फैटी एसिड संबंधित अशुद्धियों को संश्लेषित किया है, जिसमें पूरी तरह से निकलने से लेकर केवल एक छोटा सा हिस्सा शामिल है।

 

डिमर/पॉलिमर
दो या दो से अधिक टिल्पेप्टाइड अणु एक साथ मिलकर एक डिमर या उच्चतर बनाते हैं। डिमर का आणविक भार मुख्य शिखर से दोगुना है, और यह अक्सर एचपीएलसी पर एक व्यापक शिखर होता है, इसलिए इसे नियंत्रण के रूप में उपयोग करने से पहले इसे विशेष रूप से अलग और शुद्ध करना पड़ता है। हमने डिमर्स की तैयारी कर ली है, और 95% से अधिक की शुद्धता प्राप्त करने के लिए शुद्धिकरण के कई दौर लगे।

 

लिंकर-संबंधित अशुद्धियाँ
टिलपेप्टाइड के फैटी एसिड संशोधन में एक लिंकर (उदाहरण के लिए, -ग्लू, पीईजी, आदि) का उपयोग किया जाता है, और यह लिंकर स्वयं संश्लेषण के दौरान साइड प्रतिक्रियाएं उत्पन्न कर सकता है, जिससे लापता या अपूर्ण लिंकर्स के साथ अशुद्धियां उत्पन्न हो सकती हैं। इस प्रकार की अशुद्धता सामान्य पेप्टाइड्स में नहीं पाई जाती है, लेकिन टिल्पेप्टाइड के लिए अद्वितीय है, जिसका विशेष रूप से अध्ययन करने की आवश्यकता है।

 

विघटित अशुद्धियाँ
एस्परजीन (एएसएन) और ग्लूटामाइन (जीएलएन) अम्लीय या गर्म परिस्थितियों में आसानी से डीमिडेटेड हो जाते हैं, जिसके परिणामस्वरूप आइसोमर्स बन जाते हैं। टिलपेप्टाइड के अनुक्रम में कई एएसएन और जीएलएन हैं, और डीमिडेशन अशुद्धता अक्सर मजबूर गिरावट परीक्षण में दिखाई देती है, इसलिए अशुद्धता का पता लगाने के लिए नियंत्रण उत्पाद का उपयोग करना पड़ता है।

 

डायस्टेरियोइसोमर्स
लंबी श्रृंखला संश्लेषण के दौरान, व्यक्तिगत अमीनो एसिड रेसमाइज़ेशन से गुजर सकते हैं, जिसके परिणामस्वरूप डायस्टेरियोइसोमर्स बनते हैं। इस प्रकार की अशुद्धता की सामग्री आमतौर पर अधिक नहीं होती है, लेकिन घोषणा करते समय विशेषज्ञ पूछेंगे, और पुष्टि के लिए नियंत्रण उत्पाद रखना बेहतर है।

इनमें से कई अशुद्धियाँ खरीदी नहीं जा सकतीं और उन्हें कस्टम संश्लेषित करने की आवश्यकता होती है। हमने उपरोक्त सभी श्रेणियों को कवर करते हुए टिल्पेप्टाइड अशुद्धियों के अनुकूलन पर कई परियोजनाएं की हैं।

 

 

पेप्टाइड श्रृंखला का विलोपन
We synthesize whatever is missing. For example, the lysine at position 20 is missing, or the amino acid near the fatty acid attachment site is missing. We will synthesize according to your process impurity profile, and the purity is usually >95%, एमएस और एनएमआर पुष्टिकरण के साथ। हमने एन-टर्मिनल से सी-टर्मिनल तक 5 अमीनो एसिड रिक्ति वाले पेप्टाइड्स का एक सेट संश्लेषित किया है।

 

ऑक्सीकरण अशुद्धियाँ
Met in Tilpeptide is oxidized to sulfoxide or sulfone, and we can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. We can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control. The purity is >95% और हम ऑक्सीकरण की डिग्री की पुष्टि करने के लिए एलसी-एमएस स्पेक्ट्रम प्रदान कर सकते हैं। सल्फ़ोक्साइड और सल्फोन को एचपीएलसी द्वारा अलग किया जाता है, और हम दोनों कर सकते हैं।

 

फैटी एसिड शेडिंग उत्पाद
यह टिल्पेप्टाइड में काम करने वाली सबसे कठिन अशुद्धियों में से एक है। फैटी एसिड श्रृंखला पूरी तरह से बंद हो सकती है, या यह आंशिक रूप से बंद हो सकती है (उदाहरण के लिए अंतिम कुछ कार्बन गायब हैं)। हम श्रृंखला की विभिन्न स्थितियों के लिए वेरिएंट की एक श्रृंखला को संश्लेषित कर सकते हैं। हमारे द्वारा किए गए सबसे जटिल प्रोजेक्टों में से एक में, ग्राहक ने हमें फैटी एसिड श्रृंखला से गायब 8 कार्बन के साथ एक अशुद्धता को संश्लेषित करने के लिए कहा, और इसे ठीक करने में हमें दो महीने लग गए।

 

डिमर
क्रॉस {{0} लिंकिंग या गैर {{1} सहसंयोजक इंटरैक्शन द्वारा गठित डिमर को विभिन्न तरीकों से तैयार किया जा सकता है और उच्च शुद्धता नियंत्रण प्रदान करने के लिए अलग और शुद्ध किया जा सकता है। डिमर्स को शुद्ध करना श्रमसाध्य है, लेकिन हमारे पास यह जानने का अनुभव है कि मोनोमर्स को कैसे अलग किया जाए।

 

लिंकर-संबंधित अशुद्धियाँ
लिंकर (-ग्लू, पीईजी, आदि) गायब या अधूरा हो सकता है, जिसके परिणामस्वरूप संबंधित अशुद्धियों की एक श्रृंखला हो सकती है। हम लापता लिंकर्स, संक्षिप्त लिंकर्स, या बेमेल लिंकर्स के साथ विभिन्न प्रकारों को संश्लेषित कर सकते हैं, और ऐसी अशुद्धियों के स्पेक्ट्रा बनाने में आपकी सहायता कर सकते हैं।

 

विघटित अशुद्धियाँ
अनुक्रम में एएसएन और जीएलएन साइटों के लिए, हम जबरन गिरावट या लक्षित संश्लेषण द्वारा डीमिडेटेड अशुद्धता नियंत्रण तैयार कर सकते हैं। डीमिडेशन के बाद आणविक भार में अंतर केवल 1 है, जिसे एमएस द्वारा अलग करना आसान नहीं है, इसलिए पुष्टि करने के लिए हम आमतौर पर एनएमआर या विशेष क्रोमैटोग्राफिक स्थितियों का उपयोग करते हैं।

 

अन्य अनुकूलित अशुद्धियाँ
यदि आपको अपने शोध में कोई नई अज्ञात अशुद्धता मिलती है, तो हम संरचना का विश्लेषण करने और उसे संश्लेषित करने में आपकी सहायता कर सकते हैं। हमें नमूने भेजें, हम एलसी-एमएस विश्लेषण करेंगे, संरचना का पता लगाएंगे, फिर दिशात्मक संश्लेषण करेंगे, और फिर समझौते की पुष्टि करने के लिए अवधारण समय और द्रव्यमान स्पेक्ट्रम की तुलना करेंगे। हमने यह प्रक्रिया कई बार की है और सफलता दर काफी ऊंची है।

 

 

विश्लेषणात्मक विधि विकास और सत्यापन
एचपीएलसी या एलसी - एमएस विधि स्थापित करते समय, स्थानीयकरण, पृथक्करण के निर्धारण, रैखिक सीमा के सत्यापन और पुनर्प्राप्ति के लिए अशुद्धता नियंत्रण की आवश्यकता होती है। नियंत्रण के बिना, विधि सत्यापन में एक टुकड़ा गायब है। कई ग्राहक हमसे विधि स्थापित करने के लिए पहले कुछ प्रमुख अशुद्धियाँ करने के लिए कहते हैं, और फिर धीरे-धीरे बाकी को पूरा करने के लिए कहते हैं।

 

विषम द्रव्यमान स्पेक्ट्रोमेट्री
जब एक जेनेरिक दवा घोषित की जाती है, तो प्रक्रिया की अशुद्धियों और क्षरण उत्पादों के व्यापक गुणात्मक और मात्रात्मक विश्लेषण की आवश्यकता होती है। प्रत्येक अशुद्धता के स्थान, सामग्री और संरचना की पुष्टि एक नियंत्रण उत्पाद द्वारा की जानी चाहिए। हमने देखा है कि सूचना की घोषणा को भरने के लिए भेजा गया था, दस में से नौ बार इस टुकड़े की अशुद्धियाँ समझ में नहीं आतीं।

 

स्थिरता अध्ययन
दीर्घकालिक स्थिरता और त्वरित परीक्षणों में, यह निर्धारित करना आवश्यक है कि कौन से गिरावट वाले उत्पाद प्रमुख हैं और सामग्री में क्या प्रवृत्ति है। अशुद्धता नियंत्रण के साथ, हम सटीक मात्रा निर्धारित और निगरानी कर सकते हैं। एक ग्राहक टिलपेप्टाइड तैयारी की स्थिरता कर रहा था, और उसने पाया कि त्वरित परिस्थितियों में गिरावट का शिखर बहुत तेजी से बढ़ा, इसलिए हमने संरचना की पुष्टि करने के लिए एमएस द्वारा इसका विश्लेषण और संश्लेषण किया, और फिर ग्राहक को इसकी रिपोर्ट करने में राहत मिली।

 

बैच रिलीज़ परीक्षण
व्यावसायीकरण के बाद, एपीआई या फॉर्मूलेशन के प्रत्येक बैच को संबंधित पदार्थ के लिए परीक्षण करने की आवश्यकता होती है। रिलीज़ परीक्षण के लिए अशुद्धता नियंत्रण आवश्यक उपकरण हैं।

 

जेनेरिक दवा घोषणाओं पर जानकारी
अशुद्धता अध्ययन दाखिल जानकारी का एक प्रमुख भाग है। पूर्ण अशुद्धता प्रोफ़ाइलिंग और नियंत्रण डेटा प्रदान करने से समीक्षा जारी होने का जोखिम काफी कम हो जाता है।

 

 

केस 1: एक फार्मास्युटिकल कंपनी, टिल्पेप्टाइड जेनेरिक दवा कार्यक्रम
वे टिलपेप्टाइड का एक सामान्य संस्करण विकसित कर रहे हैं और विधि सत्यापन के लिए अशुद्धता नियंत्रण के एक पूरे सेट की आवश्यकता है। हमने उनके लिए 12 अशुद्धियाँ अनुकूलित कीं: 5 लापता पेप्टाइड्स, 2 ऑक्सीकृत अशुद्धियाँ, 1 डिमर, 2 फैटी एसिड शेडिंग उत्पाद, और 2 लिंकर{7}}संबंधित अशुद्धियाँ। उनमें से प्रत्येक की शुद्धता 95% से अधिक है, और एमएस और एनएमआर डेटा के साथ है। प्रोजेक्ट लीडर ने कहा, "टिलपेप्टाइड की अशुद्धियाँ अन्य पेप्टाइड्स की तुलना में दोगुनी हैं, लेकिन आप उन सभी को बना सकते हैं, और डेटा पूरा हो गया है, जिससे हमारा बहुत सारा काम बच जाता है।" बाद में, उनकी पद्धति का सत्यापन सफलतापूर्वक पूरा हो गया, और अब वे घोषणा की तैयारी कर रहे हैं।

 

केस 2: एक सीआरओ कंपनी, अशुद्धता प्रोफाइलिंग
उन्होंने टिलपेप्टाइड पर एक गुणवत्ता अनुसंधान परियोजना शुरू की, जिसके लिए प्रक्रिया अशुद्धियों के व्यापक विश्लेषण की आवश्यकता थी। उन्होंने हमें क्रूड पेप्टाइड नमूने भेजे, और हमने एलसी - एमएस विश्लेषण किया, कई अज्ञात अशुद्धियों की संभावित संरचनाएं निकालीं, फिर उन्हें लक्षित तरीके से संश्लेषित किया, और अवधारण समय और द्रव्यमान स्पेक्ट्रा की तुलना की, और चार नई अशुद्धियों की पुष्टि की - उनमें से दो लिंकर - से संबंधित थीं, और उनमें से दो फैटी एसिड शेडिंग के प्रकार थे। ग्राहक ने अशुद्धता प्रोफाइल को परिष्कृत करने के लिए इस डेटा का उपयोग किया और ग्राहक की स्वीकृति को सफलतापूर्वक पारित कर दिया।

 

केस 3: स्थिरता अध्ययन, एक जैव प्रौद्योगिकी कंपनी
वे एक टिलपेप्टाइड फॉर्मूलेशन की स्थिरता की जांच कर रहे थे और पाया कि त्वरित परिस्थितियों में एक क्षरण उत्पाद की मात्रा तेजी से बढ़ी, लेकिन उन्हें नहीं पता था कि यह क्या था। हमने एलसी-एमएस द्वारा नमूने का विश्लेषण किया और माना कि यह एक निश्चित एएसएन साइट पर एक डीमिडेशन अशुद्धता थी, और फिर इसे लक्षित तरीके से संश्लेषित किया और तुलना करके इसकी पुष्टि की। उन्होंने इस नियंत्रण का उपयोग करके एक परख स्थापित की और गिरावट वाले उत्पाद की प्रवृत्ति की सटीक निगरानी की। बाद में, जब उन्होंने रिपोर्ट प्रस्तुत की, तो डेटा के इस हिस्से पर विशेषज्ञों द्वारा जोर दिया गया और ठोस डेटा के कारण कोई मुआवजा जारी नहीं किया गया।

 

 

 

 

टिल्पेप्टाइड एक लोकप्रिय उत्पाद है, लेकिन अशुद्धता का अध्ययन एक नाजुक काम है, विशेष रूप से फैटी एसिड एक्सफोलिएशन उत्पाद और लिंकर{0}}संबंधित अशुद्धियाँ, जिन्हें कई निर्माता संभाल नहीं सकते हैं। यदि आप टिल्पेप्टाइड का गुणवत्तापूर्ण अनुसंधान या सामान्य विकास कर रहे हैं और अशुद्धता नियंत्रण की आवश्यकता है, तो कृपया बेझिझक हमसे संपर्क करें। हमने बहुत काम किया है, हम जानते हैं कि कठिनाइयाँ क्या हैं, और हम जानते हैं कि इसे कैसे दूर किया जाए।